Chemical Study13 [면역학] 항체 유전자의 구조와 발현 목차 일반적인 유전자의 구조와 발현 - 유전자는 intron과 exon으로 구성되어 있다. - Exon은 성숙한 mrna로 전사되는 염기서열이며 intron은 성숙한 mrna로 되기 전 제거되는 염기서열이다. - 유전자의 5’ 말단에는 leader sequence가 존재하며 이것은 약 10개의 소수성 아미노산으로 이루어진 signal peptide를 단백질의 N 말단에 코딩한다. - Leader Sequence 앞 부분에는 전사인자와 전사를 위한 RNA polymerase가 결합하여 전사를 조절하는 부위가 존재한다. - 전사 이후 5’ 말단의 methylguanine에 모자(cap)이 그리고 3’ 말단의 꼬리부분에 약 205개의 adenine이 붙는 poly A tail이 생긴다. - 스플라이싱 : 이 .. 2023. 10. 20. 단일클론항체와 다중클론항체의 생성과정 알아보기 목차 Monoclonal Antibodies : mAbs Mono = single = one These singular types of antibody are porduced by harvesting purified cell lines derived from a single B cell within the immunity, allowing them to bind to one unique epitope region of an antigen 장점 1. 많은 양의 동일한 항체를 생산 가능 2. 균일성이 높다. 3. 다른 항원의 epitope에 결합할 확률이 낮다. 4. 단백질 농도의 양을 요구하는 assay에서 더 좋은 결과가 나온다. 5. 정제 과정에서 매우 특이적(efficient)이고 친화도(affini.. 2023. 8. 11. 단백질 공학 Cell-free display systems for protein engineering (2) Cell - Free Display에는 5가지 방법이 존재한다. 1. Alternantive to phage display and cell surface display systems 2. In vitro compartmentalization 3. Ribosome display 4. mRNA display 5. Covalent and noncovalent DNA display 목차 4. mRNA display Linkage of genotype and phenotype by mRNA Similar with ribosome display 3' end of the mRNA template should be linked to a single stranded DNA bonded to puromycin -> cov.. 2023. 8. 11. 단백질 공학 Cell-free display systems for protein engineering (1) Cell - Free Display에는 5가지 방법이 존재한다. Alternantive to phage display and cell surface display systems In vitro compartmentalization Ribosome display mRNA display Covalent and noncovalent DNA display 5가지 중에서 (1)~ (3)을 정리하고자 한다. 목차 1. In Vitro Proetin Synthesis Reaction 3가지 필수구성요소( Cell extract, Templates, Additives to enhance protein synthesis efficiency)가 존재한다. Extract(추출물) 고려되어야할 사항들 : efficiency .. 2023. 8. 11. Flow Cytometry Based Enzyme Engineering 목차 Flow Cytometry Based Enzyme Engineering Enzyme enginneering을 이용한 세포측정법으로 the generation of fluorescence signal that reflects the phenotype of interest을 요구한다. Intracellular reaction, Cell surface display, Comparmentalization of whole cells, In vitro compartmentalization에서 이용된다. 1.Intracellular Reactions Enzyme of interest : Expressed and maintained inracelluarlu Generation of fluorescent pordu.. 2023. 7. 5. 항체 약물 접합체(ADC) 알아보기 feat. ADC 활용(휴미라, AIC) 항체 약물 접합체는 바이오의약품 시장에서 굉장히 핫한 의약품 중 하나입니다. 바이오 탐험가가 이런 의약품을 놓치고 가면 섭섭하기에..조사해 보았습니다. 목차 항체 약물 접합체(ADC) 항체를 운반체로 쓰는 항체이다. 항체가 Target을 특이저으로 인식한다는 특징을 이용해 독성이 강한 약물을 항체에 Linker로 결합한 형태를 갖는다. ADC의 3가지 기능 (1) 항체는 종양 세포표면의 항원 또는 수용체를 선택적으로 인지하여 정확하게 표적으로 이동할 수 있다. (2) 항체와 함께 이동한 약물은 종양 세포 내로 도입되면 약물의 표적에 결합하여 종양세포의 사멸을 유도할 수 있다. (3) 항체와 약물이 종양 세포를 인지하고 ㅔ포 내로 도입되는 과정에서 링커는 항체와 약물을 안정적으로 결합하고 해리되는 기능을 .. 2023. 7. 4. [유전학] 후성 유전학 개념 알아보기 : DNA 메틸화, 히스톤 아세틸화, 유전자 각인, X 염색체 불활성화 목차 DNA 서열상의 변화가 없어도 형질의 변화가 유전되는 것을 의미한다. 유전자 발현의 변화가 실제로 관여되고 이런 것이 하나의 세포로부터 다음 세대로 전달되어 후성유전의 성질을 띠게 되는 것이다. DNA에 메틸기가 붙고(DNA 메틸화)나 DNA가 감겨있는 히스톤 단백질에 변형(히스톤 아세틸화)이 생기는 현상들이 후성유전학 현상에 해당된다. 쉽게 말해서, 유전자의 서열은 인체의 설계도이다. 후성유전학은 이 설계도에 여러 가지 색으로 형광펜을 칠해놓은 것이다. 어떤 부분은 핑크색으로 더 중요하게 표시되며 어떤 부분은 푸른색으로 덜 중요하게 표시한다. DNA 메틸화 DNA 메틸화로 예를 들어보자 (2) 번 그림을 보면, 염기서열의 C에는 메틸 그룹이라는 작은 분자들이 붙을 수 있다. 이 부분에 메틸시토신-.. 2023. 6. 17. [유전학] 유전자 가위 세대별 특징 알아보기 -1세대 부터 3.5세대 까지 목차 1세대 유전자 가위 (ZFN) 1세대 유전자가위는 아연-손가락 핵산분해효소(ZFN, zinc finger nuclease)이다. 이름에 '손가락'이 들어간 이유는 이 핵산분해 효소가 손가락 형태를 띠는 아프리카 발톱 개구리의 DNA에서 유래했기 때문이다. 이 유전자는 아연과 결합하여 안정적인 구조를 만들기 때문에 아연-손가락이라는 별명을 얻었다. 아연-손가락 단백질은 세 개 정도의 아주 짧은 염기서열을 인식해서 여러 개 이어 붙여야 한다. 그래서 보통 9 - 18개의 염기를 인식하도록 제작하여야 하고 여기에 가위(Fok1) 단백질이 추가된다. Basic structure and design of a zinc finger nuclease (ZFN). ZFNs are created by joining .. 2023. 6. 16. [단백질 공학] Yeast surface display, MACS, FACS 목차 Yeast surface display 효모 세포면에 엔지니어링하고자하는 protein에 target protein을 묶는다. 이 기술은 다음과 같은 단계로 이루어집니다: 효모 세포를 재조합 단백질을 담고 있는 표현 벡터로 변형된다. 변형된 효모 세포를 성장시키면서, 벡터로부터 단백질이 효모 세포의 표면에 노출된다. 노출된 단백질이 특정 화합물에 결합하는지 검사하기 위해, 특정 표적 화합물과 반응하는 단백질을 표현하는 효모 세포의 분리를 수행한다. 분리된 세포는 후속 실험을 위해 재생산된다. scFV, Fab, T cell receptor, MHC molecules, cytokines, enzyme 등에 사용된다. 출아형 효모에서는 Aga1 - Aga2 상호작용에 이용된다. Yeast surface.. 2023. 3. 28. 이전 1 2 다음
