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Monoclonal Antibodies : mAbs
Mono = single = one
These singular types of antibody are porduced by harvesting purified cell lines derived from a single B cell within the immunity, allowing them to bind to one unique epitope region of an antigen
장점
1. 많은 양의 동일한 항체를 생산 가능
2. 균일성이 높다.
3. 다른 항원의 epitope에 결합할 확률이 낮다.
4. 단백질 농도의 양을 요구하는 assay에서 더 좋은 결과가 나온다.
5. 정제 과정에서 매우 특이적(efficient)이고 친화도(affinity)가 높다
단점
1. 비싸다.
2. 시간이 오래 걸린다.
3. 저장하는데 요구 조건이 많다.
4. 단백질이 변성 상태(denatured state) 또는 변화 형상(alterd conformation)에서 감지하는 것이 강하지 않다.
5. target protein을 빠르게 capture 하는 기능에서 덜 이상적이다.
6. pH와 buffer 상태에 더 민감하다.
7. more susceptible to binding changes when labelled
Polyclonal Antibodies
Poly = many
Describe a collection of antibodies which are grown from different B cells. This makes them capable of recognizing multiple epitopes on the same antigen
장점
1. Inexpensive
2. Easy to store
3. Quick to porduce
4. Ready to use in under four months
5. Highly stable and tolerant of pH or buffer changes
6. High avidity as the antibodies bind to more than on epitope, they can help amplify the signal from target protein even with low expression level
단점
1. Corss reactivity(특정 항원 외에 다른 항원에 결합하는 것)의 가능성이 높다.
2. 다른 시간에서 다른 동물에게 생산된 다른 배지들 사이에 높은 가변성(variability)이 존재한다.
3. Cross reactivity를 최소화하기 위해서는 The affinity purification of the serum이 요구된다.
Producing Polyclonal Antibodies : 다중클론항체 생성 과정
1. 연구와 진단 목적으로 사용되는 항체들은 특정한 항원을 갖고 있는 토끼와 같은 동물에 주입하여 얻어진다.
2. 몇 주 후, 동물의 면역계는 특정 항원에 대한 높은 level의 항체를 생성한다. 이러한 항체들은 면역 혈청(antiserum)에서 얻어진다. (면역 혈청은 항원에 노출된 동물로부터 얻어진다.)
3. 대부분의 항원들은 여러 가지 binding site가 존재하는 mutiple epitopes 구조로 존재한다. 그래서 이러한 항원들은 lab animal이 다양한 종류의 항체를 형성하도록 만든다.
4. 이렇게 형성된 항체들을 polyclonal antibody(다중클론항체)라고 일컫는다. 그리고 다중클론항체는 인간면역계에서 감염에 대한 반응이 나타난다.
5. 동물에서 나온 면역혈청은 B cells의 mutiple clones으로부터의 항체들을 포함한다. 각각의 B cell은 특정 epitope를 가진 항원들에 반응한다.
6. 동물로부터 얻어진 면역 혈청(antiserum)은 실험실에서 만들어진 인공적인 항원에 대한 항체를 포함한다. 하지만 면역 혈청은 동물이 살아있는 일생 동안 노출되는 다른 항원에 대한 항체도 포함하기 때문에 다른 항체들을 제거하는 "purifted(정제 과정)"이 필요하다. (항체가 연구 또는 진단 분석 목적으로 사용되기 전에 말이다.)
